Tak satu pun dari produk makanan hewan peliharaan yang dikumpulkan dalam penelitian ini secara khusus mencantumkan hiu pada daftar bahan.
Dengan bahan tersebut, secara ringkas, DNA diekstraksi melalui resin Chelex 100, larutan 10% Chelex (Bio-Rad) dan menyiapkan air bebas nuklease.
Disarankan berhati-hati memastikan pencampuran lengkap untuk mencegah pengendapan. Hasil pencampuran kemudian dipindahkan ke tabung PCR.
Sampel makanan hewan peliharaan berukuran kecil, kira-kira 1-2 mmdan divortex 5-10 detik, kemudian disentrifugasi.
Ketika beberapa sampel dikumpulkan dari kaleng atau paket – sesuai dengan berbagai jenis daging yang diamati – ekstraksi dilakukan secara terpisah.
Untuk ekstraksi DNA, sampel awalnya dipanaskan pada 60 °C selama 20 menit, kemudian, 99° C selama 25 menit, dan disimpan di PCR pada suhu 4 ° C.
Peneliti menggunakan pasangan primer untuk mengamplifikasi fragmen gen. Amplifikasi PCR yang berhasil diverifikasi pada gel agarosa TBE 1%, dan produk dikirim ke Macrogen Korea untuk pembersihan dan pengurutan.
Identifikasi spesies dilakukan dengan menggunakan Barcode of Life Data System (BOLD) dan fungsi Nucleotide BLAST (BLASTn) di GenBank.
Identifikasi spesies dianggap positif jika BOLD dan BLAST menemukan spesies yang sama dengan kecocokan 100%.
Komentar tentang post